"നമുക്കെല്ലാവർക്കും അറിയാവുന്നതുപോലെ, ബയോകെമിക്കൽ ലബോറട്ടറികളിലെ അടിസ്ഥാന പരീക്ഷണ രീതിയാണ് PCR." പരീക്ഷണ ഫലങ്ങൾ എല്ലായ്പ്പോഴും തൃപ്തികരമല്ല, ഇത് PCR പ്ലാസ്റ്റിക് ഉപഭോഗവസ്തുക്കളുടെ നേരിയ മലിനീകരണം മൂലമോ അല്ലെങ്കിൽ ഇൻഹിബിറ്ററുകളുടെ ആമുഖം മൂലമുണ്ടാകുന്ന പരീക്ഷണാത്മക ഇടപെടൽ മൂലമോ ആകാം. വളരെ പ്രധാനപ്പെട്ട മറ്റൊരു കാരണമുണ്ട്: ഉപഭോഗവസ്തുക്കളുടെ തെറ്റായ തിരഞ്ഞെടുപ്പും പരീക്ഷണ ഫലങ്ങളിൽ വലിയ സ്വാധീനം ചെലുത്തും.
PCR പരീക്ഷണങ്ങളുടെ ഫലങ്ങളെ ബാധിക്കുന്ന നിരവധി കാരണങ്ങളുണ്ട്: സാധാരണയായി ഇനിപ്പറയുന്ന 7 തരങ്ങളുണ്ട്.
1. പ്രൈമറുകൾ: പിസിആറിന്റെ പ്രത്യേക പ്രതികരണത്തിന്റെ താക്കോലാണ് പ്രൈമറുകൾ, പിസിആർ ഉൽപ്പന്നങ്ങളുടെ പ്രത്യേകത പ്രൈമറുകളും ഡിഎൻഎ ടെംപ്ലേറ്റും തമ്മിലുള്ള പരസ്പര പൂരകതയുടെ അളവിനെ ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നു;
2. എൻസൈമും അതിന്റെ സാന്ദ്രതയും;
3. dNTP യുടെ ഗുണനിലവാരവും സാന്ദ്രതയും;
4. ടെംപ്ലേറ്റ് (ടാർഗെറ്റ് ജീൻ) ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ്;
5. Mg2+ ഏകാഗ്രത;
6. താപനിലയും സമയവും ക്രമീകരിക്കുക;
7. സൈക്കിളുകളുടെ എണ്ണം;
8. ഉപകരണങ്ങൾ, ഉപഭോഗവസ്തുക്കൾ മുതലായവ.
സ്വാധീനിക്കുന്ന നിരവധി ഘടകങ്ങളിൽ, ഉപഭോഗവസ്തുക്കൾ വളരെ പ്രധാനപ്പെട്ടതും എളുപ്പത്തിൽ അവഗണിക്കപ്പെടുന്നതുമായ ഘടകങ്ങളിലൊന്നാണ്.
പല തരത്തിലുണ്ട്
PCR ഉപഭോഗവസ്തുക്കൾ: 8-ട്യൂബുകൾ, ലോ-വോളിയം ട്യൂബുകൾ, സ്റ്റാൻഡേർഡ് ട്യൂബുകൾ, നോൺ-സ്കിർട്ടഡ്, സെമി-സ്കർട്ടഡ്, ഫുൾ സ്കിർട്ടഡ്, കൂടാതെ പിസിആർ, ക്യുപിസിആർ പ്ലേറ്റുകളുടെ ഒരു ശ്രേണി. ഇത് തിരഞ്ഞെടുക്കുന്നത് വളരെ ബുദ്ധിമുട്ടാണ്, കൂടാതെ പൊതുവായ നിരവധി പ്രശ്നങ്ങളും ഉണ്ട്, എല്ലാവരും തിരഞ്ഞെടുക്കുന്ന പ്രശ്നങ്ങൾ നോക്കാം
PCR ഉപഭോഗവസ്തുക്കൾ, അവ എങ്ങനെ പരിഹരിക്കാം?
എന്തുകൊണ്ട്
PCR ഉപഭോഗവസ്തുക്കൾപൊതുവെ PP ഉപയോഗിച്ചാണോ നിർമ്മിച്ചിരിക്കുന്നത്?
ഉത്തരം: PCR/qPCR ഉപഭോക്താക്കൾ സാധാരണയായി പോളിപ്രൊഫൈലിൻ (PP) കൊണ്ടാണ് നിർമ്മിച്ചിരിക്കുന്നത്, കാരണം ഇത് ജൈവശാസ്ത്രപരമായി നിർജ്ജീവമായ ഒരു വസ്തുവാണ്, ഉപരിതലത്തിന് ജൈവതന്മാത്രകളോട് ചേർന്നുനിൽക്കാൻ എളുപ്പമല്ല, കൂടാതെ നല്ല രാസ പ്രതിരോധവും താപനില സഹിഷ്ണുതയും ഉണ്ട് (121 ഡിഗ്രിയിൽ ഓട്ടോക്ലേവ് ചെയ്യാൻ കഴിയും) ബാക്ടീരിയ കൂടാതെ തെർമൽ സൈക്ലിംഗ് സമയത്ത് താപനില മാറ്റങ്ങളെ നേരിടാനും കഴിയും). ഈ മെറ്റീരിയലുകൾ സാധാരണയായി റിയാക്ടറുകളുമായോ സാമ്പിളുകളുമായോ നേരിട്ട് സമ്പർക്കം പുലർത്തുന്നു, അതിനാൽ ഉൽപ്പാദനത്തിലും തയ്യാറാക്കൽ പ്രക്രിയയിലും ഉയർന്ന നിലവാരമുള്ള മെറ്റീരിയലുകളും നല്ല പ്രോസസ്സിംഗ് ടെക്നിക്കുകളും തിരഞ്ഞെടുക്കേണ്ടതുണ്ട്.