എലിസ കിറ്റ് ആന്റിജന്റെയോ ആന്റിബോഡിയുടെയോ സോളിഡ് ഫേസ്, ആന്റിജന്റെയോ ആന്റിബോഡിയുടെയോ എൻസൈം ലേബലിംഗിനെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ളതാണ്. സോളിഡ് കാരിയറിന്റെ ഉപരിതലവുമായി ബന്ധിപ്പിച്ചിരിക്കുന്ന ആന്റിജൻ അല്ലെങ്കിൽ ആന്റിബോഡി ഇപ്പോഴും അതിന്റെ രോഗപ്രതിരോധ പ്രവർത്തനം നിലനിർത്തുന്നു, ആന്റിജൻ അല്ലെങ്കിൽ ആന്റിബോഡി എന്ന് ലേബൽ ചെയ്ത എൻസൈം അതിന്റെ രോഗപ്രതിരോധ പ്രവർത്തനവും എൻസൈം പ്രവർത്തനവും നിലനിർത്തുന്നു. നിർണ്ണയ സമയത്ത്, പരിശോധനയ്ക്ക് കീഴിലുള്ള മാതൃക (ആന്റിബോഡി അല്ലെങ്കിൽ ആന്റിജൻ അളക്കുന്നത്) സോളിഡ് കാരിയറിന്റെ ഉപരിതലത്തിലുള്ള ആന്റിജനുമായോ ആന്റിബോഡിയുമായോ പ്രതിപ്രവർത്തിക്കുന്നു. സോളിഡ് കാരിയറിൽ രൂപംകൊണ്ട ആൻറിജൻ-ആന്റിബോഡി കോംപ്ലക്സ് കഴുകുന്നതിലൂടെ ദ്രാവകത്തിലെ മറ്റ് വസ്തുക്കളിൽ നിന്ന് വേർതിരിക്കപ്പെടുന്നു.
എൻസൈം-ലേബൽ ചെയ്ത ആന്റിജനുകളോ ആന്റിബോഡികളോ ചേർക്കുന്നു, അവ പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിലൂടെ ഖര കാരിയറുമായി ബന്ധിപ്പിക്കുന്നു. ഈ സമയത്ത്, ഖര ഘട്ടത്തിലെ എൻസൈമിന്റെ അളവ് മാതൃകയിലെ പദാർത്ഥത്തിന്റെ അളവിന് ആനുപാതികമാണ്. എൻസൈം പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിന്റെ അടിവസ്ത്രം ചേർത്ത ശേഷം, അടിവസ്ത്രം എൻസൈം ഉത്തേജിപ്പിക്കുകയും നിറമുള്ള ഉൽപ്പന്നങ്ങളായി മാറുകയും ചെയ്യുന്നു. ഉൽപ്പന്നത്തിന്റെ അളവ് സ്പെസിമെനിലെ പരീക്ഷിച്ച പദാർത്ഥത്തിന്റെ അളവുമായി നേരിട്ട് ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു, അതിനാൽ നിറത്തിന്റെ ആഴം അനുസരിച്ച് ഗുണപരമായ അല്ലെങ്കിൽ അളവ് വിശകലനം നടത്താം.
എൻസൈമുകളുടെ ഉയർന്ന ഉത്തേജക ദക്ഷത രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണത്തിന്റെ ഫലങ്ങളെ പരോക്ഷമായി വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു, ഇത് പരിശോധനയെ വളരെ സെൻസിറ്റീവ് ആക്കുന്നു. ആന്റിജനുകൾ നിർണ്ണയിക്കാൻ ELISA ഉപയോഗിക്കാം, മാത്രമല്ല ആന്റിബോഡികൾ നിർണ്ണയിക്കാനും ഉപയോഗിക്കാം.
ELISA കിറ്റിന്റെ അടിസ്ഥാന തത്വങ്ങൾ
വസ്തുവിനെ എൻസൈമുമായി ബന്ധിപ്പിക്കുന്നതിന് ആന്റിജന്റെയും ആന്റിബോഡിയുടെയും പ്രത്യേക പ്രതികരണം ഇത് ഉപയോഗിക്കുന്നു, തുടർന്ന് അളവ് നിർണയത്തിനായി എൻസൈമിനും സബ്സ്ട്രേറ്റിനും ഇടയിൽ വർണ്ണ പ്രതികരണം ഉണ്ടാക്കുന്നു. അളക്കാനുള്ള വസ്തു ആൻറിബോഡിയോ ആന്റിജനോ ആകാം.
ഈ നിർണ്ണയ രീതിക്ക് മൂന്ന് റിയാക്ടറുകൾ ആവശ്യമാണ്:
â സോളിഡ് ഫേസ് ആന്റിജൻ അല്ലെങ്കിൽ ആന്റിബോഡി (ഇമ്യൂൺ അഡ്സോർബന്റ്)
â¡ എൻസൈം ലേബൽ ചെയ്ത ആന്റിജൻ അല്ലെങ്കിൽ ആന്റിബോഡി (മാർക്കർ)
⢠എൻസൈം പ്രവർത്തനത്തിനുള്ള സബ്സ്ട്രേറ്റ് (വർണ്ണ വികസന ഏജന്റ്)
അളവെടുപ്പിൽ, ആന്റിജൻ (ആന്റിബോഡി) ആദ്യം സോളിഡ് കാരിയറുമായി ബന്ധിപ്പിച്ചിരിക്കുന്നു, പക്ഷേ ഇപ്പോഴും അതിന്റെ പ്രതിരോധ പ്രവർത്തനം നിലനിർത്തുന്നു, തുടർന്ന് ആന്റിബോഡി (ആന്റിജൻ), എൻസൈം എന്നിവയുടെ ഒരു സംയോജന (മാർക്കർ) ചേർക്കുന്നു, അത് ഇപ്പോഴും അതിന്റെ യഥാർത്ഥ രോഗപ്രതിരോധ പ്രവർത്തനവും എൻസൈമും നിലനിർത്തുന്നു. പ്രവർത്തനം. സോളിഡ് കാരിയറിലെ ആന്റിജനുമായി (ആന്റിബോഡി) സംയോജനം പ്രതിപ്രവർത്തിക്കുമ്പോൾ, എൻസൈമിന്റെ അനുബന്ധ അടിവസ്ത്രം ചേർക്കുന്നു. അതായത്, കാറ്റലറ്റിക് ഹൈഡ്രോളിസിസ് അല്ലെങ്കിൽ REDOX പ്രതികരണവും നിറവും.
അത് ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്ന നിറത്തിന്റെ നിഴൽ അളക്കേണ്ട ആന്റിജന്റെ (ആന്റിബോഡി) അളവിന് ആനുപാതികമാണ്. ഈ നിറമുള്ള ഉൽപ്പന്നം നഗ്നനേത്രങ്ങൾ, ഒപ്റ്റിക്കൽ മൈക്രോസ്കോപ്പ്, ഇലക്ട്രോൺ മൈക്രോസ്കോപ്പ് എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് നിരീക്ഷിക്കാനാകും, കൂടാതെ സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമീറ്റർ (എൻസൈം ലേബൽ ഉപകരണം) ഉപയോഗിച്ച് അളക്കാനും കഴിയും. രീതി ലളിതവും സൗകര്യപ്രദവും വേഗതയേറിയതും നിർദ്ദിഷ്ടവുമാണ്.